IPTG CAS:367-93-1 Herstellerpreis
Isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranosid (IPTG) ist ein synthetisches Analogon von Laktose, das häufig in der molekularbiologischen Forschung und in biotechnologischen Anwendungen verwendet wird.IPTG wird hauptsächlich zur Induktion der Genexpression in bakteriellen Systemen eingesetzt und dient dort als molekularer Auslöser für die Initiierung der Transkription von Zielgenen.
Bei Zugabe zum Wachstumsmedium wird IPTG von den Bakterien aufgenommen und kann sich an das Lac-Repressor-Protein binden und so verhindern, dass es die Aktivität des Lac-Operons blockiert.Das Lac-Operon ist eine Ansammlung von Genen, die am Laktosestoffwechsel beteiligt sind. Wenn das Repressorprotein entfernt wird, werden die Gene exprimiert.
IPTG wird oft in Verbindung mit dem lacUV5-Mutantenpromotor verwendet, der eine konstitutiv aktive Version des lac-Promotors ist.Durch die Kombination der IPTG-Induktion mit diesem mutierten Promotor können Forscher ein hohes Maß an Genexpression erreichen.Dies ermöglicht die Produktion großer Proteinmengen für die Reinigung oder andere nachgelagerte Anwendungen.
Neben der Genexpression wird IPTG auch häufig in Blau/Weiß-Screening-Assays eingesetzt.Bei dieser Technik wird das lacZ-Gen typischerweise mit einem Gen von Interesse fusioniert, und Bakterien, die dieses Fusionsgen erfolgreich exprimieren, produzieren ein aktives β-Galactosidase-Enzym.Wenn IPTG zusammen mit einem chromogenen Substrat wie X-Gal hinzugefügt wird, werden Bakterien, die das Fusionsgen exprimieren, aufgrund der Aktivität der β-Galactosidase blau.Dies ermöglicht die Identifizierung und Auswahl rekombinanter Stämme, die das interessierende Gen erfolgreich integriert haben.
Induktion der Genexpression: IPTG wird häufig verwendet, um die Expression von Zielgenen in bakteriellen Systemen zu induzieren.Es ahmt den natürlichen Induktor Laktose nach und bindet an das Lac-Repressor-Protein und verhindert so, dass es das Lac-Operon blockiert.Dies ermöglicht die Transkription und Expression der gewünschten Gene.
Proteinexpression und -reinigung: Die IPTG-Induktion wird häufig zur Produktion großer Mengen rekombinanter Proteine für verschiedene Zwecke verwendet, beispielsweise für biochemische Studien, die therapeutische Produktion oder die Strukturanalyse.Durch den Einsatz geeigneter Expressionsvektoren und IPTG-Induktion können Forscher in bakteriellen Wirten ein hohes Maß an Zielproteinproduktion erreichen.
Blau/Weiß-Screening: IPTG wird häufig in Kombination mit dem lacZ-Gen und einem chromogenen Substrat wie X-gal für Blau/Weiß-Screening-Assays verwendet.Das lacZ-Gen wird typischerweise mit dem Gen von Interesse fusioniert, und Bakterien, die dieses Fusionsgen erfolgreich exprimieren, produzieren ein aktives β-Galactosidase-Enzym.Wenn IPTG und das chromogene Substrat hinzugefügt werden, werden rekombinante Stämme, die das Fusionsgen exprimieren, blau, was eine einfache Identifizierung und Auswahl ermöglicht.
Untersuchung der Genregulation: Die IPTG-Induktion wird häufig in der Forschung verwendet, um die Regulierung von Genen und Operons, insbesondere des Lac-Operons, zu untersuchen.Durch Manipulation der IPTG-Konzentrationen und Überwachung der Expression von Lac-Operon-Komponenten können Forscher die Mechanismen der Genregulation und die Rolle verschiedener Faktoren oder Mutationen untersuchen.
Genexpressionssysteme: IPTG ist eine entscheidende Komponente in mehreren Genexpressionssystemen, beispielsweise den T7-Promotor-basierten Systemen.In diesen Systemen wird der Lac-Promotor häufig verwendet, um die Expression der T7-RNA-Polymerase voranzutreiben, die wiederum Zielgene unter der Kontrolle von T7-Promotorsequenzen transkribiert.IPTG wird verwendet, um die Expression der T7-RNA-Polymerase zu induzieren, was zur Aktivierung der Zielgenexpression führt.
| Komposition | C9H18O5S |
| Test | 99 % |
| Aussehen | weißes Puder |
| CAS-Nr. | 367-93-1 |
| Verpackung | Klein und groß |
| Haltbarkeit | 2 Jahre |
| Lagerung | An einem kühlen und trockenen Ort aufbewahren |
| Zertifizierung | ISO. |
