2-Nitrophenyl-Beta-D-Glucopyranosid CAS:2816-24-2

Enzymsubstrat: ONPG wird häufig als Substrat für β-Galactosidase verwendet, ein Enzym, das ONPG hydrolysiert und dabei eine gelbe Verbindung (o-Nitrophenol) erzeugt, die sich leicht spektrophotometrisch nachweisen lässt. Diese enzymatische Reaktion kann zur Messung der β-Galactosidase-Aktivität genutzt werden, wodurch ONPG ein wertvolles Werkzeug in der Enzymologie darstellt.

Molekularbiologische Assays: ONPG wird als Substrat in verschiedenen molekularbiologischen Assays eingesetzt, insbesondere in β-Galactosidase-Reportergen-Assays. In diesen Assays wird ein ONPG-basiertes Substrat verwendet, um die Aktivität des Reportergens zu messen, die typischerweise durch eine spezifische Promotorsequenz reguliert wird. Die β-Galactosidase-Aktivität, die sich durch den Farbumschlag bei der ONPG-Hydrolyse zeigt, liefert wertvolle Informationen über die Promotoraktivität.

Genexpressionsanalyse: ONPG wird auch zur Analyse der Genexpression eingesetzt. Durch die Verknüpfung der Promotorsequenz von Interesse mit dem β-Galactosidase-Gen können Forscher die β-Galactosidase-Aktivität mit ONPG als Substrat messen. Die β-Galactosidase-Aktivität spiegelt die Stärke und Aktivität des Promotors wider und ermöglicht so die Bestimmung der Genexpressionsniveaus.

Diagnostische Anwendungen: ONPG kann in der Diagnostik, insbesondere zum Nachweis pathogener Mikroorganismen, eingesetzt werden. Verschiedene Bakterien, wie z. B. Escherichia coli und bestimmte Shigella- und Salmonella-Arten, produzieren Beta-Galactosidase, die ONPG spalten kann. Diese Hydrolysereaktion führt zu einer sichtbaren Farbänderung, die zum Nachweis dieser Bakterien in klinischen Proben genutzt werden kann.