Phenylgalactosid CAS:2818-58-8

Einfluss auf die Enzymaktivität: Phenylgalactosid wird üblicherweise zur Messung der Aktivität des Enzyms β-Galactosidase verwendet.Wenn Phenylgalactosid durch β-Galactosidase hydrolysiert wird, wird p-Nitrophenol freigesetzt.Die Akkumulation von p-Nitrophenol kann quantitativ gemessen werden und liefert Einblicke in die Aktivität der β-Galactosidase.Dieser Effekt wird in Anwendungen wie Enzymassays und Screeningsystemen genutzt.

Genexpressionsanalyse: Phenylgalactosid wird häufig als Substrat in molekularbiologischen Experimenten zur Untersuchung der Genexpression verwendet.Das lacZ-Gen, das für β-Galactosidase kodiert, wird üblicherweise mit regulatorischen Sequenzen anderer interessierender Gene fusioniert.Die Expression des lacZ-Gens und die Hydrolyse von Phenylgalactosid durch β-Galactosidase können Aufschluss über das Expressionsmuster und das Ausmaß des untersuchten Zielgens geben.

Screening-Systeme: Phenylgalactosid ist ein wichtiger Bestandteil von Screening-Systemen, die sich die β-Galactosidase-Aktivität zunutze machen.Ein weithin bekanntes Beispiel ist das Blau-Weiß-Screening-Verfahren, das zur Identifizierung rekombinanter oder transformierter Zellen in molekularbiologischen Experimenten eingesetzt wird.Kolonien, die die rekombinante DNA erfolgreich aufgenommen oder eine genetische Rekombination durchlaufen haben, exprimieren β-Galactosidase, was zur Hydrolyse von Phenylgalactosid und der Bildung einer blauen Farbe führt.

Proteinreinigung: In einigen Fällen kann Phenylgalactosid als Ligand für die Affinitätschromatographie verwendet werden, um Proteine ​​zu reinigen, die spezifisch an β-Galactosidase binden oder durch diese aktiviert werden.Das Protein von Interesse kann einen Affinitätstag oder einen Fusionstag haben, der eine β-Galactosidase-bindende Domäne enthält.Indem man die Proteinmischung durch eine Säule mit immobilisiertem Phenylgalactosid leitet, kann das gewünschte Protein selektiv zurückgehalten und anschließend eluiert werden.